목차

Ⅰ. 실험목표
Ⅱ. 실험과정
Ⅲ. 실험과정 설명
Ⅳ. 실험결과
Ⅴ.실험 주의사항

본문내용

Ⅰ. 실험목표
1. dog serum 안의 IgG1을 정성, 정량 분석한다.
2. ELISA의 원리와 방법을 공부한다.

Ⅱ. 실험과정
1. 100μl of Capture Antibody로 casettle의 strip들을 코팅한다.
2. Washing buffer로 3회 씻는다.
3. strip의 well C에는100μl of diluted Dog Serum(x400)를, D에는 100μl of Washing buffer를 넣는다.
4. R,T에서 0.5 hr 동안 incubate한다.
5. Washing buffer로 3회 씻는다.
6. well C, D에 각각 50μl of Antibody-Enzyme Conjugate를 넣는다.
7. R,T에서 0.5 hr 동안 incubate한다.
8. Washing buffer로 3회 씻는다.
9. well C, D에 각각 50μl of Substrate를 넣는다.
10. 15-20mins 동안 기다린다.
11. well C, D에 각각 50μl of Stop Solution를 넣는다.
12. 450nm에서 absorbance를 측정한다.

Ⅲ. 실험과정 설명
casettle의 well 바닥에는 Capture Antibody가 미리 코팅되어 있었다. Capture Antibody는 well 바닥에 sorbent되어 washing buffer로 씻어도 잘 떨어지지 않게 되어있다. 이 Capture Antibody는 Goat α-Dog IgG1로 사용한다. 개의 IgG1을 염소에게 주입시켜 생산된 항체다. 3.에서 Dog Serum을 넣을 때 항원-항체 반응이 일어날 것이다. 4.에서 항원-항체 반응이 충분히 일어날 때까지 기다린 후, 실험에 무관한 단백질을 버리기 위해 다시 3번 씻는다.

참고 자료

없음